Среда f, модифициированная среда f

Среда готовится на искусственной морской воде (Табл. 1). К 1 л проавтоклавированной морской воды в стерильных условиях добавляются стерильные растоворы 1-4. Для модифициированной среды f морскую воду разбавляют деионизированной водой в соотношении 3 к 1.

Раствор объем, мл
  Раствор 1
  Раствор 2 (только для диатомовых)
  Раствор 3 1
  Раствор 4 1
                                                                          

Таблица 1. Химический состав искусственной морской воды (по Sterba, 1956; Remane, 1958).

Готовиться на деионизированной воде (mQ), автоклавируется.

Вещество: Количество (грамм на 1 литр )
  NaCl 23,45
  MgCl2×6H2O 10,550
  KCl 0,664
  CaCl2(×2H2O) 1,107 (1,47)
  KBr 0,096
  H3BO3 0,026
  Na2SO4 3,917
  SrCl2×6H2O 0,04
  NaF 0,003
  NaHCO3 0,192

Соленость около 35 промилле

Раствор 1 (100 мл)

Добавить  к 80 мл деионизированной воды mQ

NaNO3 15 г
NaH2PO4 × H2O 1 г

Довести объем водой до 100 мл. Проавтоклавировать. Разлить в стерильном ламинаре по стерильным 15 мл пробиркам одну пробирку оставить для использования, остальные хранить при -20°С.

Раствор 2 (100 мл)

Добавить  к 80 мл деионизированной воды mQ

Na2SiO3 × 9H2O 6 г

Довести объем водой до 100 мл. Для получения стерильного раствора профильтровать через 0,2 мкм фильтр в стерильном ламинаре в стерильные 15 мл пробирки с завинчивающейся крышкой . Одну пробирку оставить для использования, остальные хранить при -20°С.

Раствор 3 (100 мл)

Добавить  к 60 мл деионизированной воды mQ

Реактив количество, г
ЭДТА·Na2 0,416
FeCl3 x 6H2O 0,315
CuSO4 x 5H2O 0,001
ZnSO4 x 7H2O 0,002
CoCl2 x 6H2O 0,001
MnCl2 x 4H2O 0,018
Na2MoO4 x 2H2O 0,0003

Довести объем водой до 100 мл. Для получения стерильного раствора профильтровать через 0,2 мкм фильтр в стерильном ламинаре в стерильные 15 мл пробирки с завинчивающейся крышкой . Одну пробирку оставить для использования, остальные хранить при -20°С.

Раствор 4 (100 мл)

Добавить  к 60 мл деионизированной воды mQ

Реактив количество Концентрация в исходном растворе, г/л деионизированной воды mQ
Тиамин HCl (витамин В1) 40 мг -
Биотин
(витамин В7)
1 мл 0,1
Витамин В12 1мл 0,1

Довести объем водой до 100 мл. Для получения стерильного раствора профильтровать через 0,2 мкм фильтр в стерильном ламинаре в стерильные 15 мл пробирки с завинчивающейся крышкой . Одну пробирку оставить для использования (хранить при +4°С в темноте), остальные хранить при -20°С.

Источники:               


Remane A.
1958. Okologie des Brackwassers. Die Binnengewässer. Stuttgart, Bd. 22: 1-216.

Sterba G. 1956. Aquarienkunde. Bd. II Urania_Verlag, Leipzig-  Jena.

Guillard R.R.L & Ryther J.H. 1962 Studie s of marine planktonic diatoms. I. Cyclotella nana Hustedt and Detonula confervaceae (Cleve) Gran. Can. J.  Microbiol. 8:229-239.